除了樹薯外，所有飼料原料都含有葉酸，大部分以結合形式存在但利用率很好。啤酒和飼料酵母特別富含葉酸，其他良好來源包括植物的綠色部分、大豆粕、馬鈴薯、小麥麩皮和肝臟。穀物和魚粉則含量較低。葉酸的活性形式作為輔酶在代謝中傳遞一碳基團（如甲酰基和甲基），特別參與胺基酸和核酸的合成，並與維生素B12一起對紅血球和白血球的形成非常重要。

缺乏葉酸會導致貧血，特別是在同時缺乏維生素B12時症狀明顯，還可能出現生長遲緩、下痢和繁殖障礙，家禽會有羽毛品質差、彩色羽毛脫色、腿部損傷和產蛋量低的情況，豬則會脫毛。動物可以通過胃腸道微生物合成葉酸，但家禽和幼小動物通常不足，需要補充。使用葉酸拮抗劑（如磺胺類藥物）時需特別注意補充，成年反芻動物一般不需添加葉酸。